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阿拉丁 RIPA裂解液(強)-常備現貨

產品貨號:R301899-100ml
產品名稱:RIPA裂解液(強)
產品規格:100ml
產品簡介:
規格或純度:無抑制劑
儲存溫度:2-8°C儲存
運輸條件:冰袋運輸
阿拉丁 RIPA裂解液(強)-常備現貨

  • 產品型號:R301899-100ml
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2024-11-13
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詳細介紹
品牌阿拉丁貨號R301899-100ml
規格100ml供貨周期現貨
主要用途主要用于從動物組織和哺乳動物細胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解貼壁細胞和懸浮細胞應用領域醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥

阿拉丁  R301899-100ml  RIPA裂解液(強)

 

阿拉丁  RIPA裂解液(強)-常備現貨

產品貨號:R301899-100ml

產品名稱:RIPA裂解液(強)

產品規格:100ml

產品簡介:

規格或純度:無抑制劑

英文名稱:RIPA Lysis Buffered Solution(Strong)

儲存溫度:2-8°C儲存

運輸條件:冰袋運輸

RIPA裂解液是一種傳統的組織以及細胞快速裂解液,主要用于從動物組織和哺乳動物細胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解貼壁細胞和懸浮細胞。按照其裂解液的強度可以分為強、中、弱三類,可根據實驗需求選擇相應產品。RIPA裂解液()可以有效提取細胞核、細胞膜和胞漿蛋白,提取的蛋白可應用于蛋白定量、Western BlotIP等檢測分析。

 

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準


阿拉丁  RIPA裂解液(強)-常備現貨 

使用方法

 ()貼壁培養細胞

1.取本品置于室溫溶解混勻,根據實驗要求加入酶抑制劑。

2.去除貼壁細胞的培養液,用 PBSNS 或無血清培養液清洗1次,低速離心,棄上清,留取沉淀。

3.按照 6 孔板每孔加入150250μl 含有酶抑制劑的裂解液的比例,加入本品。移液器輕輕吹打,使裂解液和細胞充分接觸。置于冰上或 4℃裂解,通常裂解液作用于細胞 13s 內,細胞就會被裂解。通常 6 孔板每孔細胞加入 150μl 裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到 200250μl

4.1000012000g4℃離心 510min(如無低溫離心機,室溫下離心亦可),取上清。

5.后續的 SDS-PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

()懸浮培養細胞

1.取本品置室溫溶解混勻后,加入酶抑制劑。

2.低速離心懸浮細胞,棄上清,收集沉淀。

3.用手指輕彈細胞,使其松散。按照 6 孔板每孔細胞加入150250μl含有酶抑制劑的裂解液的比例,加入本品。通常 6 孔板每孔細胞加入 150μl 裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到 200250μl。再用手指輕彈以充分裂解細胞,充分裂解后應沒有明顯的細、胞沉淀。

4.1000012000g4℃離心 510min(如無低溫離心機,室溫下離心亦可),取上清。

5.進行后續的 SDS-PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

()組織樣本

1.取本品置于室溫溶解混勻后,加入酶抑制劑。

2.把組zhi剪切成細小的碎片,越小越好。

3.取在液氮或超低溫冰箱中冷凍 30min 以上的組織,迅速用液氮研磨,研磨過程盡量控制在12min 之內,以減少蛋白的降解。

4.按照每 20mg 組織加入 150250μl 裂解液的比例,加入含有酶抑制劑的裂解液。冰上或4℃裂解 1530min

5.步驟 34 亦可以采用如下過程:按照每 20mg 組織加入 150250μl 裂解液的比例加入含有酶抑制劑的本品。用玻璃勻漿器或組織研磨器勻漿,直至充分裂解,該過程盡量控制在 12min 之內,以減少蛋白的降解。

6.1000012000g4℃離心 510min(如無低溫離心機,室溫下離心亦可),取上清。

7.進行后續的 PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

注意事項

1.去除貼壁細胞的培養液后,如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不用清洗。

2.如果裂解不充分可以適當增加裂解液的用量,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。

3.如果細胞量較多,必需分裝成 50100 萬細胞/離心管,然后再裂解。大團的細胞較難裂解充分,而少量的細胞由于裂解液容易和細胞充分接觸,相對比較容易裂解充分。

4.如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 Vorte× 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

5.在低溫情況下有可能出現渾濁現象,可 37℃水浴促其溶解,不會影響使用效果;溶解時間不易過長,避免有效成分失效。

6.裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物,屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組 DNA 等的復合物。在不檢測和基因組 DNA 結合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續實驗;如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續實驗。

7.細胞裂解的操作步驟,應置于冰上或 4℃進行。

使用范圍

適用于一般生物學及醫學研究

 

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R301899-100ml  RIPA裂解液(強)  100ml

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